RESUMÉ OG FORKLARING TESTEN
Visceral leishmaniasis, eller Kala-azar, er en spredt infektion forårsaget af flere underarter af L. donovani.Sygdommen anslås af Verdenssundhedsorganisationen (WHO) til at påvirke cirka 12 millioner mennesker i 88 lande.Det overføres til mennesker ved bid af Phlebotomus-sandfluer, som får infektion fra fodring af inficerede dyr.Selvom det er en sygdom, der findes i fattige lande, er den i Sydeuropa blevet den førende opportunistiske infektion hos AIDS-patienter.Identifikation af L. donovani-organisme fra blodet, knoglemarven, leveren, lymfeknuderne eller milten giver et klart middel til diagnose.Serologisk påvisning af anti-L.donovani IgM har vist sig at være en fremragende markør for akut visceral leishmaniasis.Test brugt i klinikken er inkluderet ELISA, fluorescerende antistof eller direkte agglutinationstest 4-5.For nylig har brug af L. donovani-specifikt protein i testen forbedret sensitiviteten og specificiteten dramatisk.
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test er en rekombinant proteinbaseret serologisk test, som påviser IgG og IgM antistoffer mod L. Donovani samtidigt.Testen giver et pålideligt resultat inden for 15 minutter uden instrumenter.
PRINCIP
Leishmania IgG/IgM Rapid Test er en lateral flow kromatografisk immunanalyse.Testkassetten består af: 1) en bordeauxfarvet konjugatpude indeholdende rekombinant L. donovani-antigen konjugeret med kolloid guld (Leishmania-konjugater) og kanin-IgG-guldkonjugater, 2) en nitrocellulosemembranstrimmel indeholdende to testbånd (T1- og T2-bånd) og et kontrolbånd (C-bånd).T1-båndet er præ-coatet med monoklonalt anti-humant IgM til påvisning af anti-L.donovani IgM, T2-bånd er præcoated med reagenser til påvisning af anti-L.donovani IgG, og C-båndet er præcoated med gede-anti-kanin IgG.
Når en tilstrækkelig mængde testprøve dispenseres i prøvebrønden på kassetten, migrerer prøven ved kapillærvirkning hen over kassetten.L. donovani IgM, hvis det er til stede i prøven, vil binde til Leishmania-konjugaterne.Immunkomplekset fanges derefter på membranen af det præ-coatede anti-humane IgM-antistof, der danner et bordeauxfarvet T1-bånd, hvilket indikerer et L. donovani IgM-positivt testresultat.L. donovani IgG, hvis det er til stede i prøven, vil binde til Leishmania-konjugaterne.Immunkomplekset fanges derefter af de præ-coatede reagenser på membranen og danner et bordeauxfarvet T2-bånd, hvilket indikerer et L. donovani IgG-positivt testresultat.
Fravær af nogen T-bånd (T1 og T2) tyder på et negativt resultat.Testen indeholder en intern kontrol (C-bånd), som bør udvise et bordeauxfarvet bånd af immunkomplekset af gede-anti-kanin-IgG/kanin-IgG-guldkonjugat uanset farveudviklingen på et af T-båndene.Ellers er testresultatet ugyldigt, og prøven skal testes igen med en anden enhed.
